期刊简介

               本刊综述国内外最新生理科学研究动态及进展;报道有价值的实验结果和先进的实验方法;介绍医学教学的经验方法;探索教学改革的思路,评价新药在临床使用情况,指导临床安全合理用药,加强会员之间的交流与提高。                

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  • 杂志名称:四川生理科学杂志
  • 主管单位:四川省科学技术协会
  • 主办单位:四川省生理科学会
  • 国际刊号:1671-3885
  • 国内刊号:51-1160/R
  • 出版周期:季刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中)
四川生理科学杂志2017年第04期

miR-451a调控BAP31诱导结直肠癌细胞凋亡

许可;韩彬;柏杨;周黎明

关键词:结直肠癌, miR-451a, BAP31, 凋亡
摘要:目的:探讨miR-451a及靶蛋白BAP31在结直肠癌中的作用.方法:体外培养HCT116、SW620、SW480、DLD细胞,以Real-time PCR法检测结直肠癌细胞系中miR-451a和BAP31的相对表达量;通过建立miR-451a不同表达情况的结直肠癌细胞HCT116模型,应用抑制消减杂交方法建立抑制消减文库,从中筛选miR-451a的调控蛋白,并通过萤光素酶报告基因检测miR-451a的直接调控靶基因;采用MTT法、流式细胞术以及Hoechst染色法评价miR-451a调控的靶蛋白BAP31对结直肠细胞凋亡的调节作用.结果:在抑制杂交消减文库中得到了miR-451a可能调控的相关基因,其中在正向文库中得到BAP31、EEF1A1和CDC20等7个基因,在反向文库中得到DKK1和PSME1等4个基因.在HCT116、HT29、SW480、SW620和DLD结直肠癌细胞中miR-451a的相对表达量是正常结肠上皮细胞NCM460中的0.32、0.44、0.53、0.43和0.73倍,BAP31在DLD、HT29、SW620和HCT116结直肠癌细胞中的表达量是正常结肠上皮细胞NCM460中的1.85、2.84、2.37和3.71倍.双萤光素酶报告基因实验证明,miR-451a可作用于与BAP31开放阅读框上游177的位点,通过miR-451a作用使海肾荧光素酶的活性降低80.3%.在HCT116细胞和SW620细胞中过表达miR-451a后72h抑制率分别为39.50%和39.50%;沉默BAP31后72 h抑制率分别为45.32%和53.56%.过表达miR-451a 48 h后HCT116凋亡增加13.57%,SW620细胞凋亡率增加13.2%;沉默BAP3148 h后HCT116细胞凋亡增加5.62%,SW620细胞凋亡率增加8.68%.结论:miR-451a在结直肠癌细胞中能够直接通过调控BAP31诱导细胞的凋亡从而抑制细胞的增殖.