期刊简介
本刊综述国内外最新生理科学研究动态及进展；报道有价值的实验结果和先进的实验方法；介绍医学教学的经验方法；探索教学改革的思路，评价新药在临床使用情况，指导临床安全合理用药，加强会员之间的交流与提高。
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- 杂志名称：四川生理科学杂志
- 主管单位：四川省科学技术协会
- 主办单位：四川省生理科学会
- 国际刊号：1671-3885
- 国内刊号：51-1160/R
- 出版周期：季刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中)
hClock-(35-47)_Bax-(55-77)的表达和纯化
高梅；刘延友；汪宇辉；赵京卉；叶珊；肖静；王正荣
关键词：hClock, Bax, 原核表达, 纯化
摘要：目的:构建hClock-(35-47)_Bax-(55-77)的表达质粒,进行诱导表达,纯化和鉴定.方法:合成hClock-(35-47)_Bax-(55-77)全长DNA序列,重组入pET-32a表达载体中,测序鉴定后转化入大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株,构建好重组体的表达菌株.IPTG诱导并优化表达后,以NTA-Ni亲合层析进行分离纯化,及SDS-PAGE和Western blotting鉴定.结果:成功构建了hClock-(35-47)_Bax-(55-77)的表达载体,插入片断为128bp,表达产物相对分子质量约为23kD,经Western blotting鉴定,与抗His-Tag抗体有特异性反应.结论:hClock-(35-47)_Bax-(55-77)融合蛋白可以用原核表达的方法大量获得,并通过亲和层析纯化达到较好的纯度,为下一步的研究提供基础.
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